A PCR (polimeráz láncreakció) tesztelése a molekuláris diagnosztika alaptechnikája. A csomagolási és tesztelési folyamatok szabványosítása közvetlenül befolyásolja az eredmények pontosságát és biológiai biztonságát. Ez a cikk szakmai perspektívát nyújt a kulcsfontosságú minőség -ellenőrzési pontokról a PCR tesztelési folyamat során.
A minta átvétele és előkezelése a folyamat első lépései. A laboratóriumoknak szigorúan ellenőrizniük kell a minta azonosítását, szállítási feltételeit és a tárolási időt a minta integritásának biztosítása érdekében. A kézhezvételt követően a mintákat meg kell számozni és regisztrálni egy biológiai biztonsági szekrényben, és át kell venni a pre - feldolgozási eljárások, például a lízis és a nukleinsav -extrakció a teszt típusa alapján. Ebben a szakaszban két - személy -ellenőrző rendszerre van szükség a kereszt - szennyeződés megelőzéséhez.
A PCR reakciórendszer előkészítését tiszta padon belül kell elvégezni. Az operátoroknak a 3. szintű védőfelszerelést kell viselniük, és használniuk kell a - Nuclease -t. A reagensek készítése ragaszkodik az "egyirányú munkafolyamat" elvhez, a reagensek előkészítő területéről a mintafeldolgozási területre, majd az amplifikációs területre. A kísérleti érvényesség megfigyelése érdekében a negatív kontrollokat, a pozitív kontrollokat és a belső kontrollokat be kell vonni az egyes reakciókötegbe.
Az amplifikációs és tesztelési fázis során a PCR műszert Pre - kalibráltnak kell lennie, és ellenőrizni kell a hőmérsékleti ciklus paramétereit. A reakció eljárás általában három lépést tartalmaz: denaturáció (94 - 95 fok), lágyítás (50-65 fok) és meghosszabbítás (72 fok). A ciklusok számát a detektálási cél alapján állítják be. A valós idejű fluoreszcencia PCR megköveteli a specifikus csatornák fluoreszcencia jelküszöbének ellenőrzését is.
Az eredmény elemzését és jelentését képzett technikusoknak kell elvégezniük. A nyers adatokat legalább két szakembernek felül kell vizsgálniuk az amplifikációs görbe morfológiájának, a CT -érték valószínűségének és a minőség -ellenőrzési anyagok betartásának a szabványoknak való megfelelése érdekében. A zárójelentésnek tartalmaznia kell a vizsgálati módszertanról szóló információkat, az eredmény értelmezésének alapját és a tesztkorlátozások kimutatását.
A teljes folyamat szigorúan betartja az ISO 15189 -et és a releváns CDC -előírásokat. A PCR -tesztelés megbízhatóságának és nyomon követhetőségének biztosítása érdekében a környezetvédelmi megfigyelés, a berendezések karbantartásának és a személyzet képzésének hármas garanciarendszerét hajtják végre.