A polimeráz láncreakció (PCR) kísérletekben a reagensek és minták csomagolása közvetlenül befolyásolja a kísérleti eredmények pontosságát és biztonságát. A standard PCR csomagolási eljárásoknak szigorúan be kell tartaniuk a sterilitás, a szennyezés megelőzésének és a tiszta címkézés alapelveit. A konkrét eljárásokat az alábbiakban ismertetjük.
1. előkészítés
Mielőtt folytatná, viseljen laboratóriumi kabátot, kesztyűt és maszkot a tiszta környezet biztosítása érdekében (tiszta pad vagy biológiai biztonsági szekrény ajánlott). Ellenőrizze, hogy az összes fogyóeszköz (pl. Centrifugacsövek, PCR lemezek) mentes -e a DNASE/RNASE szennyeződéstől, és használjon autoklávozott vagy enzimet - ingyenes sterilizátorok. A reagenseket (pl. Primer, sablon -DNS, enzimek stb.) Az egyes fiolákba kell alikvotálni, hogy elkerüljék az ismételt fagyasztást - megolvadási ciklusokat.
2. Aliquoting és címkézés
Aliquoting reagensek: Használjon pipettát a mesterkeverék, az alapozók stb. Adagolására centrifugacsövekbe vagy PCR lemezkútba a kísérleti igények szerint, pontosan az egyes térfogatokat a legközelebbi mikroliter számára adva. Használjon eldobható pipette -tippeket a {- szennyeződés elkerülésére.
Címkézési szabványok: Az összes konténert egyértelműen meg kell jelölni a név, a koncentráció, a dátum és a kezelő számával. Vízálló címkék vagy közvetlen gravírozás ajánlott az olvashatatlan jelölések megelőzésére.
3. Csomagolás és tömítés
Aliquotizálás után azonnal húzza meg a centrifuga csősapkákat, vagy zárja le a PCR lemezeket (Heat - lezáró film vagy speciális ragasztófólia segítségével) a szivárgás megakadályozása érdekében. Hosszú - kifejezés tárolására javasoljuk, hogy a csomagolást lezárt táskába tegye, és adjon hozzá egy szárítószert (például szilikagélgyöngyöket) a száraz környezet fenntartásához.
4. Tárolás és szállítás
Csomagolás után a PCR reagenseket külön-külön kell tárolni - 20 fokon (hosszú - kifejezés) vagy 4 fok (rövid távú), hogy elkerüljék a hőmérsékleti ingadozásokat. A szállítást egy szigetelt tartályban kell végezni, párnázó anyaggal töltve, hogy megakadályozzák a sokkot és a szivárgást. A bioházos mintákhoz az ENSZ 3373 vagy a releváns rendeletek szerinti biológiai biztonsági csomagolási követelményeknek való megfelelés szükséges.
A szabványosított PCR csomagolási eljárások nélkülözhetetlenek a kísérleti megbízhatósághoz. A szigorú aszeptikus vezérlés és az egyértelmű címkézés hatékonyan csökkentheti a szennyeződés kockázatát és biztosíthatja az adatok pontosságát.
